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細菌DNA/RNA提取試劑盒的運輸條件

更新日期: 2023-12-07
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動物內臟、肌肉組織、血液以及培養的細胞和細菌等樣本在裂解液和蛋白酶K的作用下破碎并可使大部分蛋白質變性,釋放出基因組DNA。在其所提供的合適的鹽離子和pH環境的作用下,與乙醇混合后,基因組DNA特異性地結合于膜上,大部分蛋白質及其他雜質在兩次洗滌過程中被洗下,而DNA與膜結合牢固,在洗脫液的作用下被洗下。
本試劑盒可以從多種樣本中提取基因組DNA,包括動物內臟、肌肉組織、血液以及培養的細胞和細菌等。本法基于對基因組DNA具有高度選擇性的高分子膜材料,只需幾個步驟即可完成提取過程,在30分鐘內完成高純度DNA的提取。
本試劑盒提取的DNA可以用于Real-time PCR、測序等分子生物學實驗。
儲存運輸:蛋白酶K保存于2~8℃。其余成分可室溫儲存。保存得當可穩定使用18個月。
操作步驟:
1.將200μL上述樣本和10μL蛋白酶K加入一只新的1.5mL離心管,然后加入200μL裂解液,震蕩混勻5-10秒。
2.56℃溫育10分鐘。
3.在上述離心管中加入200μL無水乙醇,充分震蕩混勻5-10秒(此步驟不可離心)。
4.將步驟4混勻的液體吸取至一只套有收集管的吸附柱上(注意不要吸到懸浮的雜質,以免阻塞吸附膜),6000-8000rpm離心1分鐘,棄去管內液體。
5.將500μL去蛋白漂洗液加入吸附柱中,10000rpm離心30-60秒,棄去管內液體。
6.將700μL洗滌液加入吸附柱中,10000rpm離心30-60秒,棄去管內液體。
7.將吸附柱放回接液管上,13000rpm離心2分鐘。
8.將吸附柱轉移到一只干凈的1.5mL離心管(不提供)中。
9.向吸附柱內加50-100μL洗脫液,室溫靜置1分鐘,13000rpm離心1分鐘,棄吸附柱,離心管中液體含有基因組DNA。提純的DNA如果不立刻使用,請保存于-20℃。
 
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